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技術(shù)文章
人白介素1試劑盒IL-1α ELISA kit
2013
6-19IL-1aELISA試劑盒用途：人IL-1aELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿、緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)液中的IL-1a。本實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)天然的和重組的IL-1a。本試劑盒于研究，而非用于診斷。試驗(yàn)原理：IL-1a試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）?？笽L-1a特異多克隆抗體包被微孔板，已知IL-1a濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣本、對(duì)照樣本和未知樣本加入微孔內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將IL-1a抗原和生物素標(biāo)記的抗IL-1a特異單克隆抗體同時(shí)孵育。洗滌后，加入親和素過氧化物酶。再經(jīng)過孵育和...+ -
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細(xì)胞目錄
2013
6-19人類組織正常及永生化細(xì)胞編號(hào)細(xì)胞代號(hào)細(xì)胞名稱0152293EE轉(zhuǎn)化人胚腎293細(xì)胞（B類）0153293ETET轉(zhuǎn)化人胚腎293細(xì)胞（B類）0154293KBKB轉(zhuǎn)化人胚腎293細(xì)胞（B類）0091293T人胚腎T細(xì)胞0093A7d野生型人C-KIT受體細(xì)胞株（B類）0127AMS3（SCF3）人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株（B類）0128APP-PS1人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株（HEK293）（B類）0108CCC-ESF-1人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞（自建）0107CCC-...+ -
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可溶性凋亡基因sCD95（APO1/Fas） ELISA 試劑盒
2013
6-19sCD95（APO1/Fas）ELISA試劑盒用途：人sCD95ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿、緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)液中的可溶性CD95（APO-1,Fas）。本實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)天然的和重組的sCD95。本試劑盒于研究，而非用于診斷。試驗(yàn)原理：sCD95試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。抗sCD95特異單克隆抗體包被微孔板，已知sCD95濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣本、對(duì)照樣本和未知樣本加入微孔進(jìn)行檢測(cè)。先將sCD95抗原和生物素標(biāo)記的抗sCD95特異單克隆抗體同時(shí)孵育...+ -
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堿性成纖維生長因子（bFGF）的藥理作用和臨床應(yīng)用
2013
6-19堿性成纖維生長因子（簡(jiǎn)稱bFGF）是哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)存在的一種微量物質(zhì)，在多種組織細(xì)胞中分布有bFGF受體，因而其生理作用廣泛，是一種多功能細(xì)胞生長因子，bFGF于1974年首先由美國科學(xué)家Gospodarowicz從牛垂體中分離出，方法復(fù)雜，價(jià)格昂貴。現(xiàn)在運(yùn)用基因工程技術(shù)，由大腸桿菌可大量表達(dá)生產(chǎn)高活性、高純度的bFGF，從而使之大規(guī)模應(yīng)用于臨床。國內(nèi)外大量研究結(jié)果表明，bFGF通過促進(jìn)與創(chuàng)傷修復(fù)有關(guān)的幾乎所有細(xì)胞的迅速增殖而推動(dòng)創(chuàng)面主動(dòng)修復(fù)，顯著縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間，全面提高...+ -
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石蠟切片免疫組化染色步驟
2013
6-191、載玻片的處理：抗原修復(fù)過程中，由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響，極易造成脫片。為保證試驗(yàn)的正常進(jìn)行，可選用我公司提供的ZLI-9001APES、ZLI-9003HistogripTM或ZLI-9005Poly-L-Lysine等幾種試劑，對(duì)已清洗的載玻片進(jìn)行處理。具體方法如下：1.1APES：現(xiàn)用現(xiàn)配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES，置通風(fēng)櫥中晾干即可。用此載玻片撈片時(shí)...+ -
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血小板計(jì)數(shù)法（直接試管法）
2013
6-19１原理用一種能破壞血液中的紅細(xì)胞，但能保護(hù)血小板形態(tài)完整的稀釋液稀釋血液，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，在高倍鏡下直接計(jì)數(shù)血小板數(shù)。２器材和試劑器材同白細(xì)胞計(jì)數(shù)法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法：尿素１０ｇ，福爾馬林０．１ｍｌ，枸櫞酸鈉０．５ｇ，加水至１００ｍｌ，溶解后過慮，在冰箱內(nèi)保存。３操作步驟ａ．用２ｍｌ吸管準(zhǔn)確吸取血小板稀釋液０．３８ｍｌ置小試管中。ｂ．從耳垂采血，用０．０２ｍｌ吸管準(zhǔn)確吸取*滴血，吹入稀釋液中，并吹吸兩次洗凈吸管壁內(nèi)的血。ｃ．充分振搖，滴入...+ -
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白細(xì)胞計(jì)數(shù)法（試管法）
2013
6-19１原理用稀乙酸將血液稀釋２０倍，使紅細(xì)胞全部溶解，滴入白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，求得每立方毫米血液中的白細(xì)胞數(shù)。２器材和試劑２．１器材生物顯微鏡、Ｎｅｕｂａｕｅｒ氏血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、０．０２ｍｌ吸管、小試管、刺血針、２ｍｌ吸管。２．２試劑白細(xì)胞稀釋液：采用３％乙酸溶液。３稀釋液的配制采用３％乙酸溶液。即取冰乙酸３ｍｌ，加蒸餾水至１００ｍｌ混合。亦可于上述稀釋液中加美藍(lán)或龍膽紫液１～２滴，便于觀察。稀釋液應(yīng)經(jīng)常過濾，以除去塵埃、異物或微生物的影響。４方法４．１取血于小試管中加...+ -
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影響ELISA試驗(yàn)效果常見問題原因分析及解決辦法
2013
6-19ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長（特別是...+ -
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實(shí)驗(yàn)采血要點(diǎn)
2013
6-19材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4％的溶液備用。（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：枸櫞酸鈉（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml...+ -
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血細(xì)胞分離原理
2013
6-19在體外進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測(cè)時(shí)，首先必須進(jìn)行淋巴細(xì)胞的分離。分離淋巴細(xì)胞的方法很多，但不管采用哪種方法，均要求分離的淋巴細(xì)胞純度高、產(chǎn)量多，而且不喪失活性，同時(shí)也要求分離技術(shù)簡(jiǎn)單、操作方便。外周血液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的比例在幾百甚至上千比一，兩類細(xì)胞的大小和密度不同，其沉降速度也就不同。紅細(xì)胞的自然沉降率較快，加入高分子量的聚合物，如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結(jié)合，可以將淋巴細(xì)胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細(xì)胞一般包括單核細(xì)胞。除去單...+ -
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ELI-SPOT 及其應(yīng)用
2013
6-19一、原理ELI-SPOT，即斑點(diǎn)ELISA，是利用酶標(biāo)板作反應(yīng)容器進(jìn)行的酶聯(lián)免疫反應(yīng)。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應(yīng)板，封閉后，依次加入待檢標(biāo)本、生物素化檢測(cè)抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物，陽性結(jié)果出現(xiàn)斑點(diǎn)顯色，利用倒置顯微鏡進(jìn)行斑點(diǎn)計(jì)數(shù)。其優(yōu)勢(shì)在于可在與體內(nèi)（活體條件）極接近的條件下，在體外對(duì)細(xì)胞分泌成分（如細(xì)胞因子、Fas等）進(jìn)行追蹤研究。幾點(diǎn)說明：l反應(yīng)板：ELI-SPOT所用的反應(yīng)板可以是PVDF膜包被好的，也可以是普通酶標(biāo)板。如用普通...+ -
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細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動(dòng)態(tài)分析
2013
6-19細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動(dòng)態(tài)分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針，可對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標(biāo)記并對(duì)它們進(jìn)行比率值和濃度梯度變化測(cè)定。由于細(xì)胞內(nèi)鈣離子為傳遞信息的第二信使，對(duì)細(xì)胞生長分化起著重要作用，通過單標(biāo)記或雙標(biāo)記對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子和其它離子的熒光強(qiáng)度和分布測(cè)定，測(cè)定樣品達(dá)到毫秒級(jí)的快速變化。借助光學(xué)切片功能可以測(cè)量樣品深層的熒光分布以及細(xì)胞光學(xué)切片的生物化學(xué)特性的變化。通過不同時(shí)間段的檢測(cè)可...+
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